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高通量组合式纳米抗体研发平台


NBbiolab 纳米抗体研发中心专注于纳米抗体研发,目前建立了国际一流的基于Yeast display,Phage display,NGS &生物信息学分析的高通量纳米抗体研发平台。基于组合式的高通量纳米抗体发现平台,NBbiolab已经为国内70多家抗体药企业提供了纳米抗体发现服务。


高通量纳米抗体研发平台


Yeast display and Phage display



传统的方法首先免疫羊驼,在动物体内进行亲和力成熟,然后采用phage display 方法,通过phagemid 载体构建单价展示系统与增加选择压力来获得高亲和力纳米抗体。这是目前国内外最常用的方案。


优势:

a)大肠杆菌具有高的转化效率,从而获得高库容量的抗体文库

b)实验设备要求低,不需要特殊仪器

c)周期短,成本低


缺点:

a)抗体基因来源于真核体系,而phage display技术利用原核体系,一些对大肠杆菌有毒的克隆就会生长缓慢甚至死亡,因此在扩增过程中会导致克隆丢失;

b)大肠杆菌在生长过程中不能保证每个克隆在扩增过程中的均一性,从而导致克隆筛选出现偏向;

c)未插入片段的载体或移码突变的片段在扩增过程中的生长速率远远超过正确插入片段的克隆,导致库容量的直线下降。


NBbiolab 采用组合式的研发路线


方案一:

传统的挑单克隆进行鉴定,费时费力,且通量低,只能获得高丰度的克隆,低丰度的克隆丢失。NBbiolab采用同源重组与“零背景载体”技术构建高质量噬菌体展示文库,经过1~2轮的panning后,进行NGS测序与生物信息学分析,获得大量的候选克隆,并剔除有额外二硫键的克隆。


方案二:

通过我们的同源重组与“零背景载体”技术构建高质量噬菌体展示文库,经过1~2轮的panning后,将洗脱噬菌体的抗体片段构建到Yeast display 载体中,直接通过FACS分选到96孔或384孔板中,最后通过流式进行单克隆鉴定。通过FACS分选,可直接获得高亲和力的纳米抗体,不需要对克隆进行表达纯化,直接区分克隆之间的亲和力高低。


方案三:

免疫后将VHH基因克隆Yeast display载体中,通过磁珠或FACS进行1~2轮的分选直接获得高亲和力的克隆,将分选的克隆进行NGS测序与生物信息学分析,获得100+的候选克隆。

联系

企业邮箱:service@nb-biolab.com


公司地址:成都市温江区青啤大道319号


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工作时间:9:00-18:00


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